Таблица пиков

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Меню Обработка/Выдать отчет или меню Метод/ Настройка отчета или

Таблица пиков является основной частью отчета, содержащей все результаты выполненного хроматографического анализа.

В столбцах Таблицы пиков представлены результаты измерений и расчетов, выполненных программой, а также информация, введенная пользователем в Таблицу компонентов. Набор столбцов, включаемых в таблицу, зависит от выбора метода расчета (см. далее раздел Выбор метода расчета и задание параметров).

Кроме строк, соответствующих пикам, в конце таблицы включается итоговая строка (от нее можно отказаться, установив флажок Без итога). В этой строке представляются суммарные, средние или максимальные значения для каждого столбца. Итоговая величина определяется, как правило, только с учетом значений для пиков, включенных в таблицу, но для некоторых столбцов учитываются все пики хроматограммы, поэтому в описании каждого столбца указано, как определяется итоговая величина и какие пики при этом учитываются.

При расчете высоты, площади и концентрации в % используется нормирующий коэффициент NORM, равный доле вещества, состав которого должен быть определен при выполнении данного анализа, от общего количества вещества в пробе (в %). Этот коэффициент вводится в поле Нормировка на листе Проба окна Паспорт и по умолчанию равен 100.

Алгоритм расчета некоторых параметров настраивается в

Метод/Настройка метода/Формулы (далее просто Формулы).

В Таблицу пиков могут быть включены следующие столбцы.

Номер компонента в Таблице компонентов, если в поле Порядок печати выбрано значение По компонентам, или номер пика на хроматограмме, если выбрано значение По пикам (см. раздел Выбор метода расчета и задание параметров). Итоговая величина показывает общее количество строк, включенных в таблицу.

Время (или объем) удерживания пика tn. Для фармакопейных методов расчитывается по положению вершины пика. Может быть настроено на вычисление медианного(время выхода половины площади) и средневзвешенного (первый математический момент) времен выхода. Итоговая величина соответствует продолжительности хроматограммы.

AВо всех таблицах Отчета для величин, измеряемых в единицах удерживания, используются одни и те же единицы измерения, заданные в окне Идентификация.

Ширина пиков на половине высоты Wn|50 (в тех же единицах что и Время удерживания ).

Итоговая величина равна среднему значению полуширины для всех пиков, включенных в таблицу.

Высота пика Hn. Единицы указываются в соответствии с установкой на листе Каналы окна Настройка метода для канала, по которому производится разметка, установленному в поле Канал в окне Параметры разметки.

Итоговая величина равна сумме высот всех пиков, включенных в таблицу.

Нормированная высота пика Hn%, вычисляемая по формуле

где NORM – нормирующий коэффициент, а суммирование производится по всем пикам хроматограммы.

Итоговая величина равна сумме нормированных высот для всех пиков, включенных в таблицу. Таким образом, если в таблицу входят все пики или установлен флажок Отчет о всех пиках, итоговая величина равна NORM.

Площадь пика An. Единица измерения равна произведению единицы, установленной для оси Y, на единицу, определяемую следующим образом: если для оси X установлено мин или сек, используется сек, при установке мл или мкл используется мкл, в остальных случаях – установленная единица удерживания.

Итоговая величина равна сумме площадей всех пиков, включенных в таблицу.

Нормированная высота пика An%, вычисляемая по формуле

где NORM – нормирующий коэффициент, а суммирование производится по всем пикам хроматограммы.

Итоговая величина равна сумме нормированных площадей для всех пиков, включенных в таблицу. Таким образом, если в таблицу входят все пики или установлен флажок Отчет о всех пиках, итоговая величина равна NORM.

Фактор удерживания (фактор емкости, коэффициент удерживания) компонента K'n, вычисляемый по формуле

, где (tn – t0) - скорректированное время удерживания компонента, t0 – мертвое время колонки (см. раздел Настройка метода/Формулы ).

Итоговая величина равна фактору удерживания для последнего пика хроматограммы.

При включении этого столбца в таблицу требуется задание мертвого времени (если мертвое время не задано, все K'n = 0).

Разрешение (коэффициент разделения) пары соседних пиков Rn, обычно вычисляемый по формуле

Часто используются также следующие формулы:

где t – время удерживания пика; W|X – ширина пика на уровне X% (X=50, X=60.7), или по базовой (BL); n и n+1 – номера соседних пиков, независимо от того, включен ли n+1-ый пик в таблицу.

Все выражения дают сходный результат, и любое из них может быть использовано, если нет специальных требование какого-либо стандарта. Первая формула имеет некоторое преимущество в случае плохо разрешенных пиков. Выбор формулы осуществляется на листе Формулы окна Настройки метода.

Разрешение для последнего пика, а также итоговая величина не вычисляются.

Число теоретических тарелок для пика Nn. Вычисляется по формуле

где tn – время удерживания, Hn – высота, An – площадь пика. (Если на листе Формулы/Настройки метода установлен флажок Вычесть мертвое время при вычислении эффективности, в формулах для расчета эффективности вместо tn или M1используется соответственно величина (tn – t0) или (M1 – t0), где t0 – мертвое время (см. раздел Настройка метода/Формулы).)

Часто используются также следующие формулы:

где Wn|50 – полуширина пика, Wn|BL – ширина на уровне базовой линии или тангенты. Все три формулы дают близкий результат для отдельно стоящих пиков Для смежных (неразделенных) пиков предпочтительно использовать первую формулу, так как высота и площадь измеряются со значительно меньшей погрешностью, чем ширина пика. Выбор той или иной формулы осуществляется на листе Формулы окна Настройки метода.

Может использоваться также формула для расчета через центральные моменты:

где M1 – первый момент (время удерживания, рассчитанное как центр тяжести пика), M2 – второй центральный момент (σ2).

Итоговая величина равна среднему значению для всех пиков, включенных в таблицу.

Количество теоретических тарелок на метр N’n для пика. Вычисляется по формуле

где L – длина колонки (в мм), заданная в поле Длина на листе Колонка окна Паспорт.

Итоговая величина равна среднему значению для всех пиков, включенных в таблицу.

Приведенная высота hn, эквивалентная теоретической тарелке (ПВЭТТ). Вычисляется по формуле:

где L – длина колонки (в мм), dp - диаметр частиц (в мкм).

Итоговая величина равна среднему значению ПВЭТТ для всех пиков, включенных в таблицу.

При включении этого столбца в таблицу требуется задание длины колонки и размера зерна сорбента колонки на листе Колонка окна Паспорт.

Отношение высоты пика к величине размаха шума (peak-to-peak). Вычисляется по формуле

Асимметрия пика asn вычисляется как установлено в Формулах: на уровне 10% от высоты пика как отношение ширины за вершиной пика WTn к ширине перед его вершиной WFn или на уровне 5% как отношение полной ширины Wn к удвоенной ширине перед его вершиной WFn

где |10, |05 означает, что все входящие в формулу величины берутся на уровне 10% или 5% соответственно. Выбор формулы осуществляется на листе Формулы окна Настройки метода. Величина asn, как правило, больше 1, то есть, пики имеют “хвосты”.

Итоговая величина равна среднему значению асимметрии для всех пиков, включенных в таблицу.

Фактор отклика, указанный в столбце ФО таблицы компонентов RFi.

Итоговым значением RF является средневзвешенное значение фактора отклика, рассчитанное с весами, равными нормированным откликам, по одной из формул:

причем суммирование производится только по пикам, включенным в таблицу. Эта величина может использоваться как фактор отклика для универсального компонента.

Концентрация (абсолютная) компонента Ci, вычисленная по формуле

где Qi(ri) - вычисленное по градуировочной зависимости количество вещества, соответствующее величине отклика ri,V' - приведенный объем пробы, V – объем, D - разведение, a – количество (см. раздел Величины, используемые для расчетов.

Если градуировка не проводилась, то Qi(ri) = ri•RFi, где RFi - фактор отклика, указанный в Таблице компонентов (по умолчанию равен 1). Концентрация отлична от 0 только для всех идентифицированных (включенных в Таблицу компонентов) пиков.

Итоговое значение равно сумме концентраций всех компонентов.

Нормированная концентрация компонента Ci %, вычисляемая по формуле

, где NORM – нормирующий коэффициент, а суммирование производится по всем компонентам.

Итоговая величина равна сумме нормированных концентраций компонентов. Таким образом, итоговая величина для общей Таблицы пиков, а также сумма итоговых величин для таблиц групп, всегда равны NORM.

где Ve = Qs(rs)/Cs - эффективный объем пробы; Cs - концентрация стандарта, введенная в поле Концентрация станд.; Qs(rs) – вычисленное по градуировочной зависимости количество стандарта, соответствующее величине отклика rs.

Если градуировка не проводилась, Qs(rs) = rs•RFs, Qi(ri) = ri•RFi и относительная концентрация вычисляется по формуле

где RFs и RFi - факторы отклика для стандарта и i-того компонента, указанные в Таблице компонентов. В случае, если RFs принимается равным 1, а для остальных компонентов указываются относительные величины факторов отклика RFi', формула преобразуется к виду

Итоговая величина равна сумме концентраций всех компонентов, за исключением стандарта, поскольку считается, что стандарт введен в анализируемую пробу искусственно.

Нормированная относительная концентрация C’i %, вычисленная по формуле

где NORM – нормирующий коэффициент, а суммирование производится по всем компонентам, кроме стандарта.

Итоговая величина равна сумме нормированных относительных концентраций компонентов (также за исключением стандарта). Таким образом, итоговая величина для общей Таблицы пиков, а также сумма итоговых величин для таблиц групп, всегда равны NORM.

Количество вещества qi= Qi(ri), вычисленное по градуировочной зависимости в соответствии с величиной отклика ri

Индекс компонента Ii, рассчитанный программой в соответствии с установками на листе Формулы окна Настройки метода: по временам удерживания текущей хроматограммы (если задана Внутренняя шкала) или временам удерживания из Таблицы компонентов (если задана Внешняя шкала), путем Линейной или Логарифмической интерполяции (см. раздел Количественный и качественный анализ/Индексы удерживания) с использованием значений индексов для отдельных компонентов, введенных пользователем в Таблицу компонентов.

Итоговым значением I является средневзвешенное значение индекса, рассчитанное с весами, равными нормированным концентрациям, по формуле:

причем суммирование производится только по пикам, включенным в таблицу.

Первые три буквы, отделенные двоеточием, определяют способ разделения соседних пиков:

B	разделение по базовой линии,

D	разделение по вертикальной линии,

R	пик-наездник.вертикальной линии и заканчивается на базовой линии.

Например:
BBH – основной пик, который начинается и заканчивается на базовой линии;
DBR – пик-наездник, который начинается от .

Первую позицию после двоеточия может занимать одна из следующих букв:

S	стандарт для расчета концентраций, заданный в поле Стандарт на листе Проба окна Паспорт.

A	стандарт для расчета концентраций, выбранный программой в случае, когда пользователь его не задал

C	градуировочный стандартный компонент, заданный в окне Компонент (если он не совпадает со стандартом для расчета концентраций)

R	реперный компонент, заданный в Таблице компонентов

р	специальный компонент (для которого указан хотя бы один локальный параметр в окне Компонент)

?	информация по данному пику недостоверна из-за превышения допустимого диапазона АЦП или детектора,

!	концентрация компонента выходит за пределы, установленные в Таблице компонентов в столбцах мин.С или макс.С

N	компонент вне области градуировки

Группа столбцов, включающая относительные факторы отклика для всех каналов, кроме опорного канала, выбранного в диалоговом окне Компонент, по отношению к которому они рассчитываются. Столбцы имеют в заголовках имена каналов, их число на единицу меньше их полного числа.

Имя файла хроматограммы. Этот столбец рекомендуется включать в Таблицу пиков в том случае, когда отчеты для нескольких хроматограмм записываются в один файл. Если в дальнейшем при обработке такого файла используется совместная сортировка строк всех вошедших в него таблиц (например, сортировка по компонентам для вычисления погрешности измерений для каждого компонента по данным нескольких хроматограмм), в столбце Имя файла сохраняются сведения об источнике данных.

Имя хроматограммы, указанное в поле Имя на листе Общие окна Паспорт. Этот столбец имеет то же назначение, что и столбец Имя файла.

AДля любой величины, которая включена в Таблицу пиков, пользователь может задать точность представления (число знаков), внеся необходимые изменения в rtt-файл (см. Файл шаблона отчета ).