Справочник по основным операциям > Градуировка > Количественное измерение концентрации компонентов
____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Для определения количества содержания компонента в образце можно использовать различные величины. В программе МультиХром предусмотрено несколько стандартных методов расчета, которые оптимизированы для измерения тех или иных величин. Выбор метода производится в окне Опции отчета.
Где можно увидеть результаты измерения концентрации
Результаты расчета содержания компонентов представлены:
•в отчете в виде Таблицы пиков вместе с рядом других параметров пиков, набор которых определяется выбранным методом расчета (см. раздел Отчет/Таблица пиков).
•в столбце Таблицы концентраций;
•на графике хроматограммы, если для пиков выбраны метки .
Определение относительного содержания компонентов (без проведения градуировки)
В ряде случаев нет требуется определять истинную концентрацию компонентов, достаточно узнать их относительное содержание в смеси, то есть, нет необходимости выполнять градуировку.
Если известно, что чувствительность детектора для всех компонентов одинакова (равны величины ФО), мерой количества компонента может служить площадь или высота пика. В этом случае можно использовать метод расчета Нормировка отклика и обойтись даже без создания Таблицы компонентов, а результат получить в Таблице пиков отчета. В этой таблице будут приведены в абсолютных единицах значения площади [сек∙ед.высоты] или высоты [ед.высоты] пиков (в зависимости от выбранной величины в поле окна Компонент), а также будет представлен столбец относительных значений этих величин в % от суммы площадей или высот всех пиков.
Если факторы оклика для компонентов различны, но известны их относительные величины, можно использовать метод расчета Внутренняя нормализация. В этом случае необходимо создать Таблицу компонентов и ввести относительные значения ФО в соответствующий столбец. Концентрация рассчитывается как произведение площади или высоты на ФО. Результат будет представлен в Таблице пиков в виде столбца от суммы концентраций для всех компонентов.
Определение абсолютной концентрации компонентов
Определение абсолютной концентрации компонентов производится только на основании градуировки, которая может быть выполнена для всех компонентов методом внешнего или внутреннего стандарта. Можно также использовать табличный метод с проведением градуировки только для одного компонента и вводом в Таблицу компонентов относительных ФО для всех остальных компонентов, известных из литературных данных или других источников. Независимо от метода градуировки для расчета в этом случае используется метод Абсолютная концентрация.
Для расчета концентрации i-того компонента используется формула
, где ri – измеренная величина отклика, Qi(ri) – вычисленное исходя из градуировочной зависимости количество i-того компонента, V - объем введенной пробы, D - разведение пробы, А – количество (см. раздел Паспорт хроматограммы/Проба).
Результат будет представлен в Таблице пиков в виде столбца , выраженных в заданных пользователем единицах, и в виде столбца от суммы концентраций для всех компонентов.
Определение относительной концентрации компонентов (расчет методом внутреннего стандарта)
При расчете относительной концентрации (метод расчета Относительная концентрация ). полагается, что концентрация одного из компонентов, именуемого стандартом, известна заранее. Эта дополнительная информация используется программой для корректировки концентраций остальных компонентов.
Обозначим концентрацию стандарта в растворе пробы CS. Другая величина, получаемая из градуировочной кривой стандарта - количество стандарта, достигшее детектора QS(rS).
Используя эти две величины, вычисляется эффективный объем введенной пробы:
Эта величина учитывает все ошибки определения объема вводимой пробы, потери образца во время пробоподготовки и т. д.
Концентрация i-го компонента вычисляется путем деления количества компонента, достигшего детектора Qi(ri), на эффективный объем пробы Ve по формуле:
Результат будет представлен в Таблице пиков в виде столбца , выраженных в заданных пользователем единицах, а также в виде столбца (от суммы концентраций для всех компонентов за вычетом концентрации стандарта).