Спектры многоканальных хроматограмм

Справочник по основным операциям > Многоканальные хроматограммы > Обработка многоканальных хроматограмм > Факторный анализ > Спектры многоканальных хроматограмм

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Одним из широко распространенных вариантов многоканальных хроматограмм являются хро­матограммы, получаемые путем измерения поглощения излучения в узком спектральном диапазоне, как правило, в УФ области спектра, для некоторого набора длин волн. Отклик каждого детектора зависит от коэффициента поглощения вещества для соответствующей длины волны, а совокупность всех откликов может быть названа спектром компонента, так как является грубым подобием спек­тра поглощения вещества. По аналогии спектром компонента, а также спектром пика, участка или отдельной точки хроматограммы можно назвать совокупность откликов всех детекторов, независимо от природы регистрируемых сигналов.

Определение спектра для различных участков или точек одного хроматографического пика позволяет исследовать его однородность (гомогенность). Если пик связан только с одним компо­нентом, спектр сигнала в переделах всего пика будет неизменен. И наоборот, различие спектров отдельных участков пика свидетельствует о том, что в действительности этот пик образовался в результате наложения двух или более близкорасположенных пиков разных компонентов с отличаю­щимися спектрами. Таким образом, анализ спектров многоканальных хроматограмм является мощ­ным средством выделения отдельных компонентов при их плохом хроматографическом разделении.

Для исследования количественных характеристик спектров удобно воспользоваться их представлением в виде векторов. В случае двухканальной хроматограммы спектр представляется на плоскости в виде вектора, проекции которого на оси X и Y равны откликам детекторов 1 и 2 соответственно. Мерой различия двух спектров может служить угол между их векторами.

Для многоканальной хроматограммы спектр является вектором абстрактного многомерного пространства, который не имеет столь простого наглядного представления. Однако угол между век­торами по-прежнему можно использовать как меру различия двух спектров (два вектора, выходящие из одной точки, всегда лежат в одной плоскости).

Для однородного хроматографического пика угол между спектрами соседних точек мало отли­чается от нуля (примерно на величину шума). Если же пик неоднороден, этот угол заметно возрас­тает, достигая максимумов в областях максимального перекрытия пиков и минимумов там, где существенно преобладает только один из компонентов.

По величине угла между спектрами можно достаточно надежно определить, является ли тот или иной пик однородным и оценить число компонентов. Однако для точного определения числа компонентов, вносящих свой вклад в сигнал на анализируемом участке хроматограммы, более эффективным является использование строгого аппарата факторного анализа. При этом макси­мальное число определяемых компонентов (факторов) равно числу каналов хроматограммы.